O
DNA
(ácido desoxirribonucleico) é um dos ácidos nucleicos que constituem o material
genético da maioria dos seres vivos. O DNA é formado por nucleotídeos, e cada
nucleotídeo é formado por uma molécula de desoxirribose, uma molécula de
fosfato e uma base nitrogenada que pode ser púrica ou pirimídica. As bases
púricas encontradas no DNA são adenina e guanina; e as bases pirimídicas são
citosina e timina, sendo que a adenina liga-se à timina e a guanina liga-se à
citosina através de pontes de hidrogênio.
Objetivo:
Esta
atividade teve como objetivo, extrair o DNA das células da banana , para
visualização do material genético, promovendo assim a descoberta da localização
do mesmo. Além da aplicação de conhecimentos sobre estrutura da membrana
celular.
Material
e Métodos:
Com o auxílio de dois copos ou béqueres, amassar duas bananas, pode-se utilizar
para isso um almofariz e pistilo, ou outro recipiente que sirva para o mesmo,
misturando junto 3 gramas de sal de cozinha ( NaCl) ,10 ml de detergente de
cozinha e mais 10 ml de água destilada.
Após aquecer a mistura em banho-maria por 15 minutos, utilizando para isso um
fogão ou outra fonte de fogo, como bico de bussen ou lamparina mantendo um
cuidado ao manusear o mesmo. Utilizando um termômetro meça a temperatura da
água para que ela não aqueça demais. Em um funil colocar 2 gazes na parte larga
para filtrar, formando uma espécie de peneira. Utilizando cubos de gelo
forrar uma bandeja e colocar uma proveta entre os cubos, encaixe o funil na
boca da proveta. Agora despejar o conteúdo da mistura no funil com gaze até
filtrar.
Dividir o conteúdo filtrado em tubos de ensaio e adicione 10 ml de álcool
também previamente resfriado. Após observe as partes formadas e com um pegador
em forma de gancho ou um palito, insira dentro do tubo e puxe para cima
lentamente.
Conclusão/
Resultados:
Nos tubos de ensaio pode-se observar duas
fases após o adicionamento do álcool resfriado, na parte inferior formou-se
uma fase aquosa e na parte superior a fase alcoólica (sobrenadante).
A trituração foi
realizada para romper as paredes celulares e as membranas celulares, liberando
o conteúdo celular. A filtração permitiu separar as paredes celulares e as
membranas citoplasmáticas do restante do conteúdo celular.
O detergente
dissolve as membranas lipídicas alem de desintegrar os núcleos e os cromossomos
das células da banana, liberando o DNA. Com a ruptura das membranas, o conteúdo
celular, incluindo o DNA e proteínas, se soltam e se dispersam na solução. Um
dos componentes do detergente, o lalril sulfato de sódio, desnatura as
proteínas, separando-as do DNA cromossômico.
A adição de
sal, no inicio da prática, proporcionou ao DNA um ambiente favorável. O
sal contribuiu com íons positivos Na+ que neutralizaram a carga negativa do
DNA, precipitando-o na solução aquosa.
O álcool gelado,
além de proporcionar uma mistura heterogênea (duas fase) em ambiente salino,
faz com que as moléculas de DNA se aglutinem não se dissolva no álcool, na
concentração e na temperatura que se usou nesta prática. Pelo fato do DNA ser
menos denso que a água e a mistura aquosa dos restos celulares, ele se
localiza na interface da fase alcoólica e aquosa.
Apesar
de o DNA ser a maior molécula da célula a sua estrutura não pode ser observada
a olho nu, devido ao seu tamanho microscópico. Tal como não podemos observar a
maior parte das células a olho nu, mas podemos observar um organismo
constituído por milhões de células, também não podemos observar uma
moléculas de DNA mas podemos observar como verificamos na pratica , milhões de
cadeias de DNA aglomerados.
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